《来自hu136535792的回答:》
表面等离子体共振(SPR)是一种光学现象,可用于在自然条件下实时跟踪生物分子相互作用。该方法对生物分子没有损伤,并且不需要任何标记。
首先,将生物分子(目标分子)结合到生物传感器表面,然后将含有能够与目标分子相互作用的另一种生物分子(分析物)的溶液注入并流过生物传感器表面。生物分子的结合导致生物传感器的表面质量增加,导致折射率以相同比例增加,并且观察到生物分子反应的变化。该反应以反应单位(RU)测量:1 RU=1克蛋白质/mm2=1×10-6 RIU(折射率单位)。
在注射过程中,分析物通过对流和扩散流过相互作用表面,与目标分子形成复合物,导致分析物浓度的变化。在微流体系统中应用nL级流动通道使浓度变化到最低点,以保证高质量传递系数(km)。为了确保分析物的质量转移不受限制,结合到生物传感器表面的目标分子的浓度必须低。当分析物被注射时,分析物-目标分子复合物在生物传感器表面上形成,导致增强的反应。然而,当分析物被注射时,分析物-目标分子复合物解离,导致反应减弱。动力学常数可以通过用组合的相互作用模型拟合反应曲线来确定。然而,非特异性结合和总折射率偏移均衡效应可以通过参考曲线减法功能来消除。
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首先,将生物分子(目标分子)结合到生物传感器表面,然后将含有能够与目标分子相互作用的另一种生物分子(分析物)的溶液注入并流过生物传感器表面。生物分子的结合导致生物传感器的表面质量增加,导致折射率以相同比例增加,并且观察到生物分子反应的变化。该反应以反应单位(RU)测量:1 RU=1克蛋白质/mm2=1×10-6 RIU(折射率单位)。
在注射过程中,分析物通过对流和扩散流过相互作用表面,与目标分子形成复合物,导致分析物浓度的变化。在微流体系统中应用nL级流动通道使浓度变化到最低点,以保证高质量传递系数(km)。为了确保分析物的质量转移不受限制,结合到生物传感器表面的目标分子的浓度必须低。当分析物被注射时,分析物-目标分子复合物在生物传感器表面上形成,导致增强的反应。然而,当分析物被注射时,分析物-目标分子复合物解离,导致反应减弱。动力学常数可以通过用组合的相互作用模型拟合反应曲线来确定。然而,非特异性结合和总折射率偏移均衡效应可以通过参考曲线减法功能来消除。
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